A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I. V. Levantsevich, S.N. Elansky
Azken urteotan, patata eta hazien izakinen egoera fitosanitarioa nabarmen okertu da Bielorrusian. Zenbait organismo kaltegarrien rola eta horien erlazioa agrofitozenosietan aldatu egin da. Oso zabalduta dauden gaixotasun askoren kaltegarritasuna (tizka berantiarra, alternarioa, mota guztietako azala, bakteriosia, fusarium usteldura lehorra) areagotu egin da, baita nahikoa aztertu gabeko berriak ere, hala nola zaurien usteldura urtsua (1. irudia). Indian, Erdialdeko Asian eta hegoaldeko beste herrialde batzuetan gertatzen den gaixotasun hau Bielorrusiako Gomel, Brest, Grodno eta Minsk eskualdeetan antzeman zen. Lurzoruan bizi diren beste oomizeto batzuek bezala, P. ultimum-ek kalte handiak eragiten ditu gehiegizko hezetasun baldintzetan - gaizki drainatutako guneetan, euri luzeetan (Taylor et al., 2008).
Bielorrusian, gaixotasunaren hedapena hazkunde garaian tenperatura handitu zen urteetan nabaritu zen: patata sorta batzuetan tuberkuluen% 8-10 kaltetu ziren. Tuberkuluen zauri ur ustelak kalte handiak eragiteko gai da, hau da, barietate erresistenterik ezak, babes neurri garatuak eta tuberkuluak kaltetuta daudenean gaixotasunaren garapen azkarrak eragindakoa (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). Gaixotasunak tuberkuluei bakarrik eragiten die. Errusian, zaurien usteldura urtsua oraindik ez da esanguratsua.
Lan honetan, Vektar Bielorrusiar, Skarb eta hazkuntza hibridoetako kaltetutako patata tuberkuluetatik isolatutako zauri urtsuaren ustelkeriaren eragileen 4 andui ikertu ditugu Bielorrusiako Zientzia Zientzien Akademiako Patata eta Baratzezaintzako Zentro Zientifiko eta Praktikoko biltegietan. (Minsk eskualdea). Azterketaren helburuak isolatu isolatuen espezieak zehaztea ziren, patulako tuberkuluekiko duten birulentzia zehaztea, giro tenperatura desberdinetan hazkundea eta metalaxiloarekiko erresistentzia ebaluatzea.
Isolatuen mizelioa ilar likido ertainean hazten zen (180 g ilar berde izoztu 10 minutuz egosi ziren litro 1 distilatutako uretan, eta ondoren 30 minutuz 1 atm-tan autoklavatu ziren); DNA tentsio bakoitzetik isolatu zen. DNA isolatzeko, izoztutako mizelioa nitrogeno likidoan trituratu zen, CTAB bufferrean lisatu eta gero kloroformoarekin deproteinizatu zen. DNA desionizatutako uretan gorde zen –20 ° С. Espezie espezifikoen genomako eskualdeen nukleotidoen sekuentzien analisiak (18S eta 5,8S gene erribosomiko nuklearraren eskualdeak, bai eta ITS1 transgenikoko transgeniko tarte transgenikoa) ITS1 eta ITS2 (White, 1990) anplifikazioak anplifikaturik erakutsi zuten aztertutako anduiak direla. Pythium ultimum Trow espezieari. (sinonimoa Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
Aztertutako andui guztiek ganbarako hezeguneetan jarritako Gala patata tuberkuluen xerrak eragin zituzten. Orban ilunak sortu ziren haien gainean, geroago ultzera ultze heze eta sakon bihurtuz (2. irudia). Infekzioa P. ultimum mycelium tuberkulu zatiaren erdian jarriz burutu zen.
Inokulatutako tuberkulu diskoak + 22 ° C-tan inkubatu ziren. Kaltetutako eremuko gehieneko hazkunde-tasa lehenengo 2 egunetan antzeman zen, orduan ultzera-eremua ia ez zen aldatu.
Eredu hau aztertutako andui guztietarako balio zuen.
Tentsioen hazkunde tasa olo agar ertainean kalkulatu da 5, 15, 24 eta 34 ° C-ko tenperaturetan (3. irudia). Tenperatura guztietan hazkundea ikusi zen; hazkunde-tasa maximoa 24 ° C-tan antzeman zen (86 mm-ko edalontzia guztiz gainezka zegoen 2 egunetan). 15 eta 34 ° C-tan, hazkunde-tasa nabarmen txikiagoa izan zen (kopa 4 eta 3 egunetan gainezka zegoen hurrenez hurren).
15, 24 eta 34 ° C-ko tenperaturetan, aztertutako andui guztien hazkunde-tasak ez ziren desberdinak. 5 ° C-ko tenperaturan, P1 tentsioa beste batzuk baino askoz azkarrago hazi zen (20 mm 4 egunean), P4 - zertxobait mantsoago (10 mm 4 egunean), P2 eta P3 ia ez ziren hazten.
Gainera, kontuan hartu behar da 24 ° C-ko tenperaturan hazkundea plater batean landatu eta berehala hasi zela, 15 eta 34 ° C-ko tenperaturetan, hazkunde aktiboaren hasiera egun 1 atzeratu zela eta 5 ° C - 2 egun.
Metalaxyl (eta bere mefenoxam isomeroa) lurzoruko oomizetoak kontrolatzeko sendagairik eraginkorrena dela aitortzen da. Metalaxil gai da tuberkuluetan barneratzeko eta epe luzeko babesa emateko ere (oso kontzentrazio baxuetan) (Taylor et al., 2008; Bruin et al., 1982). Hala ere, metalaxiloaren eraginkortasuna nabarmen murrizten da populazioetan andui erresistenteak agertu ondoren. Erresistentzia handiko anduiak aurkitu dira Estatu Batuetako hainbat eskualdetan (Taylor et al., 2002). Ez dago Bielorrusiako P. ultimum anduiek metalaxiloarekiko duten erresistentziari buruzko daturik, eta, beraz, lan horretan drogarekin duten erresistentzia probatzea erabaki zen.
Metalaxil fungizidarekiko sentikortasunaren azterketa olo agar ertainean egin zen, kontzentrazio desberdinetan fungizida gehituta (Pobedinskaya eta Elansky, 2014).
Aztertutako anduiek zenbait desberdintasun izan zituzten metalaxiloarekiko erresistentzian (1. taula). Horrela, 1 mg / L fungizida kontzentrazioarekin, P4 anduiaren hazkundea guztiz gelditu zen, eta gainerako anduiak asko moteldu ziren. P1 eta P2 anduiak oso poliki hazi ziren 10 mg / L-ko metalaxil kontzentrazioa zuten euskarrian. EC50 kontzentrazio efektiboa kalkulatuta (tentsioaren hazkunde-tasa kontrolarekin alderatuta 2 aldiz moteltzen duen fungizidaren kontzentrazioa) tentsio guztietarako 1 mg / L baino txikiagoa izan zen. Horrela, ikertutako andui guztiek metalaxil jasan zuten; P. ultimum-en hazkundea inhibitzeko oso eraginkorra dela frogatu da.
Bruin et al. (1982) landareak metalaxiloarekin landaretzan 0,5 kg / ha dosi batean tratatu ondoren, tuberkuluetan fungizida pilatzea 0,055 μg / g zen peridermoan, 0,022 μg / g geruza kortikalean eta 0,034 μg / g tuberkuluaren erdialdea. Gure datuen arabera, metalaxil kontzentrazio hori ez da nahikoa gaixotasunari aurre egiteko, baina bere garapena moteldu dezake.
Olo ertainean haztean, andui guztiek oosporak sortu zituzten monokultiboan (4. irudia), hau da, P. ultimum-en tipikoa. Tentsioak binaka parekatuta egoteak ez zuen bateraezintasun begetatiboaren sintoma ikusgarririk erakutsi - katiluak mizelioz estalita zeuden.
Lortutako datuek adierazten dute P. ultimum fitopatogenoa dela, tenperatura tarte zabalean hazkunde azkarra egiteko gai dena, 5 ° C-ko biltegiratze tenperaturan barne. Patata-tuberkuluen ehunekiko birulentzia du eta epe luzera bizirauteko gai diren oosporak eratzen ditu. Beraz, espeziea nekazaritzarako mehatxua sor dezakeen fitopatogeno arriskutsua da eta azterketa osagarriak behar ditu.
Ikerketa Errusiako Zientzia Fundazioaren laguntzarekin egin da (N 14-50-00029 proiektua).
Taula 1. P. ultimum anduiek metalaxilarekiko duten sentikortasuna
Tentsioa | Metalaxil kontzentrazioa, mg / l | ||
0 (kontrola) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Gutxi gorabehera. 3 neurketen batez besteko datuak ematen dira.
Artikulua "Potato Protection" aldizkarian argitaratu zen (1eko 2017. zk.)